湘央医学技術専門学校・湘央生命科学技術専門学校

応用生物科学科&愛玩動物看護学科BLOG

  • Entry Date
  • 2018.6.13

バイオ通信 No.1842「コロニーハイブリダイゼーション-1」

2年生の遺伝子工学実習でコロニーハイブリダイゼーションを行いました。
形質転換菌のシャーレを使います。
 
コロニー内に組換えDNA分子があるかどうかを調べます。

 
ニトロセルロースメンブレンにコロニーを写し取ります。

 
狙いを定めて空気が入らないように密着させます。

 
1分ほど密着させたら、静かにメンブレンをはがしていきます。

 
変性液につけてDNAを一本鎖にします。

 
中和液、リゾチーム液、プロテアーゼ液と反応させていきます。
自然乾燥後に80℃、2時間加熱することによってDNAをメンブレンフィルターに固定させます。
 
次はメンブレンフィルター上におけるDNAのハイブリダイゼーションを行います。
 
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